Validierung des laborspezifischen Konversionsfaktors für BCR::ABL1 p210

Die Standardisierung der BCR::ABL1 Quantifizierung nach der internationalen Skala (IS) ist von großer Bedeutung für das Krankheitsmanagement der chronischen myeloischen Leukämie (CML). Der hierfür nötige laborspezifische Konversionsfaktor wird jährlich im Rahmen einer Qualitätssicherungsrunde neu bestimmt. In den letzten fünf Jahren war das MLL Teil des EUTOS-Projekts, in dem unter anderem ein Vorgehen entwickelt wurde, welches jedem Labor ermöglicht, seinen Konversionsfaktor zukünftig selbst zu ermitteln. Die wichtigsten Ergebnisse des Projektes und damit verbundene zukünftige Neuerungen haben wir für Sie zusammengefasst.

Die Überwachung des molekularen Ansprechens mit Hilfe einer verlässlichen BCR::ABL1 Quantifizierung ist essentiell für Patienten mit chronischer myeloischer Leukämie (CML) unter Tyrosinkinaseinhibitor-Therapie. Dabei ist die Standardisierung der BCR::ABL1 Quantifizierung nach der internationalen Skala (IS) von besonderer Wichtigkeit für das Krankheitsmanagement eines jeden Patienten. Es dient dem Abgleich der Analyseergebnisse mit den Richtlinien und Empfehlungen des Europäischen Leukämienetzes (ELN) und ermöglicht den Vergleich der Ergebnisse zwischen unterschiedlichen Laboren.

Bereits seit 2011 bestimmt das MLL den standardisierten Wert BCR::ABL1^IS, welcher wie folgt berechnet wird:

Der laborspezifische Konversionsfaktor wird jährlich im Rahmen einer Qualitätssicherungsrunde neu bestimmt. Bislang war dies mit einem zeitaufwändigen Probenaustausch mit anderen Referenzlaboren verbunden. Zwischen 2016 und 2021 war das MLL Teil des EUTOS (EUropean Treatment and Outcome Study) Projekts, einer Initiative des ELN und Novartis Oncology.

Wesentliche Ziele der Studie waren:

• Optimierung gegenwärtiger Untersuchungsverfahren bei der CML
• Verbesserung von Therapieergebnissen
• Standardisierung der molekularen Verlaufskontrolle in der CML-Therapie
• Erreichen einer universellen Vergleichbarkeit von Befunden verschiedener Labore

Das EUTOS-Projekt untersuchte unter anderem die Verwendung eines sekundären BCR::ABL1 Referenzpanels auf Basis lyophilisierter Zellen zur Bestimmung und Validierung von Konversionsfaktoren nach IS. Dieses Referenzmaterial ist auf das primäre internationale genetische Referenzpanel der WHO zur Quantifizierung der BCR::ABL1 Translokation zurückzuführen (Cross et al., Leukemia 2016). Es besteht aus fünf Komponenten, jede enthält lyophilisierte Zellen, die jeweils einer spezifischen BCR::ABL1 Expressionsrate zuzuordnen sind (Abbildung 1).

Ergebnisse des EUTOS-Projekts (Auszug):

• Sekundäre Referenzpanels können erfolgreich für die Ermittlung und Validierung von Konversionsfaktoren eingesetzt werden.
• Der Einsatz sekundärer Referenzpanels ist dem Austausch von Proben gleichwertig und deutlich weniger aufwändig.
• Die Verwendung sekundärer Referenzpanels zur eigenständigen Validierung des laborspezifischen Konversionsfaktors wird empfohlen.

Inzwischen ist das in der Studie eingesetzte Untersuchungspanel kommerziell erhältlich und steht Laboren zur selbständigen Validierung ihres Konversionsfaktors zur Verfügung (aktuell einziger Anbieter AcroMetrix™ BCR::ABL1 Panel, Thermo Fisher Scientific, Abbildung 1).

Das EUTOS Konsortium stellt auf seiner Homepage eine Berechnungsvorlage zur Ermittlung des Konversionsfaktors gemäß ihrer Kriterien zur Verfügung (https://www.uniklinikum-jena.de/eutos/Downloads.html). Durch Eintragen der ermittelten Messwerte wird der individuelle Konversionsfaktor bestimmt. Diese Berechnung ersetzt zukünftig das jährlich ausgestellte Zertifikat von EUTOS.

Der neu validierte Konversionsfaktor wird auf der MLL Homepage veröffentlicht und kann dann für ein Jahr zur Berechnung der BCR::ABL1^IS bei den CML-Verläufen herangezogen werden.