Akute myeloische Leukämie (AML) - Immunphänotypisierung MRD

Immunologisch bestimmte MRD-Level haben bei Patienten mit AML einen grossen Einfluss auf die Prognose. Angesichts der oftmals nur geringen Unterschiede der Immunphänotypen bei AML im Vergleich zu normalem Knochenmark beschränkten sich die ersten Arbeiten auf Fälle, bei welchen sehr aberrante leukämieassoziierte Immunphänotypen (LAIP) vorlagen. Zu diesen zählen vor allem die aberrante Koexpression lymphatischer Marker (CD19, CD7, CD56) sowie die asynchrone Expression von Progenitorzell- und Differenzierungsmarkern (z.B. CD34+CD117-CD15+). Sowohl für die MRD-Level, die nach Erreichen einer kompletten Remission bestimmt wurden, als auch für jene, die nach Durchführung einer Konsolidierungstherapie erhoben wurden, ergab sich ein deutlicher Einfluss auf das Rezidiv-freie Überleben sowie auf das Gesamtüberleben. Neuere Untersuchungen verfolgten das Ziel, die immunologischen MRD-Analysen auch auf Patienten mit weniger aberranten LAIP auszuweiten, um alle Patienten mit einer AML mit dieser Methode zu erreichen. Durch die Verwendung eines umfangreichen Panels monoklonaler Antikörper wurde dieses Ziel realisiert und - unter Berücksichtigung aller Patienten – im Mittel eine Sensitivität von 0,05% erzielt. Die in der Folge durchgeführten Untersuchungen bestätigen den prognostischen Wert der MRD-Last in der Immunphänotypisierung: Basierend auf dem MRD-Level ist bereits am Tag 16 der Induktionstherapie eine prognostische Einschätzung möglich. Auch die nach Erreichen einer kompletten Remission sowie nach Abschluss der Konsolidierungstherapie ermittelten MRD-Level hatten einen unabhängigen Einfluss auf die Prognose. Bei Patienten mit AML ist somit die multiparametrische Durchflusszytometrie in praktisch allen Fällen zur MRD-Bestimmung geeignet; für molekulare Techniken ist dies in etwa der Hälfte der Fälle möglich. Die folgende Tabelle stellt ein umfangreiches Antikörper-Panel dar, dessen Verwendung die Bestimmung eines LAIP ermöglicht.

 

Panel zur Detektion Leukämie-assoziierter aberranter Immunphänotypen (LAIP) bei AML

Kombination	FITC	PE	ECD	PC5	PC7
1	Isotyp	Isotyp	Isotyp	Isotyp	Isotyp
2	CD64	CD87	CD56	CD4	CD45
3	CD65	CD2	CD13	CD34	CD45
4	CD9	HLA-DR	CD33	CD34	CD45
5	CD11b	CD116	CD117	CD34	CD45
6	CD34	CD56	CD33	CD19	CD45
7	CD15	CD7	CD33	CD34	CD45
8	CD36	CD61	CD235a	CD14	CD45
9	CD4	7.1	CD13	CD14	CD45
10	CD38	CD135	CD90	CD34	CD45
11	CD15	CD133	CD117	CD34	CD45
12	Isotyp	Isotyp	Isotyp	Isotyp	CD45
13	MPO	LF	cCD33	cCD34	CD45
14	TdT	cCD22	cCD79a	cCD3	CD45

c: zytoplasmatisch;
Kombinationen 12-14: zytoplasmatische Bestimmungen;
7.1: Antikörper zur Detektion des NG2-Antigens